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獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室的診斷檢測(cè)技術(shù)以及硬件建設(shè)
獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室建設(shè)注意事項(xiàng),主要是從獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室做為動(dòng)物疫病預(yù)防控制過(guò)程中的重要一環(huán),不僅擔(dān)負(fù)著動(dòng)物疫病病原監(jiān)測(cè)和流行病學(xué)調(diào)查、免疫抗體效果監(jiān)測(cè)、動(dòng)物疫病診斷等重要職責(zé),還能夠?yàn)閯?dòng)物疫病的預(yù)防控制提供重要的理論依據(jù)和參考憑證,在動(dòng)物疫病防控體系中占有重要的地位。
當(dāng)前,規(guī)模養(yǎng)殖企業(yè)、養(yǎng)殖場(chǎng)、養(yǎng)殖戶對(duì)動(dòng)物疫病控制的要求越來(lái)越高,迫切需要全方位的疫病診斷檢測(cè)服務(wù)。而當(dāng)前動(dòng)物疫病十分復(fù)雜,畜禽傳染病已成為畜牧養(yǎng)殖業(yè)發(fā)展的重要障礙,傳統(tǒng)的靠臨床癥狀和剖檢診斷已很難確診。此外,畜牧業(yè)的生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)觀念發(fā)生了根本轉(zhuǎn)變,“防重于治”的疫病防控觀念已為廣大養(yǎng)殖工作者所接受。因此,加強(qiáng)獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室建設(shè)十分必要。
一、獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室常用的診斷檢測(cè)技術(shù)
動(dòng)物疫病診斷常用的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)診斷技術(shù)包括:獸醫(yī)病理學(xué)診斷與檢測(cè)技術(shù)、血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)、分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)和病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)等。
1.1 病理學(xué)診斷檢測(cè)技術(shù)
獸醫(yī)病理學(xué)診斷技術(shù)是獸醫(yī)病理學(xué)的一個(gè)組成部分,它運(yùn)用病理學(xué)和其它學(xué)科的知識(shí),通過(guò)檢查畜禽的病理變化(肉眼檢查及病理組織學(xué)檢查)來(lái)診斷疾病的一種方法,為研究病理變化的發(fā)生、發(fā)展和結(jié)局的規(guī)律性、探索未知疾病和進(jìn)一步認(rèn)識(shí)已知疾病提供重要的科學(xué)資料。此外,病理學(xué)診斷與免疫學(xué)技術(shù)相結(jié)合增加了病理學(xué)診斷技術(shù)的可靠性,如免疫組織化學(xué)技術(shù),是根據(jù)標(biāo)記的抗體(或抗原)對(duì)細(xì)胞、組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)進(jìn)行定性、定位或定量檢測(cè),通過(guò)組織化學(xué)顯色后,用肉眼或在顯微鏡或熒光顯微鏡下觀察結(jié)果。
1.2 血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)
血清學(xué)檢測(cè)技術(shù)是建立在抗原抗體特異性反應(yīng)基礎(chǔ)上的檢測(cè)技術(shù),按照反應(yīng)性質(zhì)不同可分為凝集性反應(yīng)(如凝集試驗(yàn)和沉淀試驗(yàn))、標(biāo)記抗體技術(shù)(包括熒光抗體、酶標(biāo)抗體、放射性標(biāo)記抗體等)、補(bǔ)體參與的反應(yīng)、中和試驗(yàn)(病毒中和試驗(yàn)和毒素中和試驗(yàn))以及免疫轉(zhuǎn)印技術(shù)等。其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)是當(dāng)前應(yīng)用最廣的一項(xiàng)技術(shù)。
1.3 分子生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)
利用分子生物學(xué)技術(shù),建立對(duì)動(dòng)物疫病病原基因的檢測(cè)方法,用于動(dòng)物疫病特異性快速診斷和病原基因變異快速分析,及時(shí)掌握動(dòng)物疫病分子流行病學(xué)動(dòng)態(tài),為疫病防治提供基因理論分析依據(jù)。在獸醫(yī)臨床診斷中,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)是發(fā)展最快和最實(shí)用的分子生物學(xué)診斷技術(shù),它是一種體外快速擴(kuò)增DNA的技術(shù),同時(shí),結(jié)合RNA反轉(zhuǎn)錄技術(shù)對(duì)各種病原的DNA和RNA進(jìn)行快速擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物通過(guò)瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分析,達(dá)到快速診斷的目的。
1.4 病原學(xué)檢測(cè)技術(shù)
運(yùn)用現(xiàn)代微生物學(xué)和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù),開(kāi)展對(duì)動(dòng)物病毒、細(xì)菌和寄生蟲等致病性微生物的分離、培養(yǎng)和鑒定工作對(duì)于獸醫(yī)臨床疫病診斷具有重要意義。細(xì)菌病原的檢測(cè)包括細(xì)菌的分離與接種、細(xì)菌的培養(yǎng)、細(xì)菌的鑒定及耐藥性檢測(cè)等內(nèi)容。病毒分離與鑒定是病毒性疫病檢測(cè)、診斷和流行病學(xué)調(diào)查的重要方法之一。由于寄生蟲有其獨(dú)特的發(fā)育史,其檢測(cè)方法除了一般的流行病學(xué)調(diào)查和臨床診斷檢測(cè)外,還包括蟲卵檢查法、蟲體檢查法、免疫學(xué)檢測(cè)方法和分子生物學(xué)檢測(cè)方法。
病原學(xué)檢測(cè)主要目的是對(duì)患病的個(gè)體或群體進(jìn)行更準(zhǔn)確的診斷,以便及時(shí)采取正確的處理措施;對(duì)動(dòng)物進(jìn)行檢疫,確定是否帶有某種病原;對(duì)疫病進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、追蹤調(diào)查或回顧性調(diào)查;以及對(duì)未知的新發(fā)疫病病原進(jìn)行鑒定等。
二、獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室的硬件建設(shè)
2.1 實(shí)驗(yàn)室布局
根據(jù)功能要求,獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室應(yīng)至少設(shè)置病理學(xué)診斷檢測(cè)室、血清學(xué)檢測(cè)室、病原學(xué)檢測(cè)室和分子生物學(xué)檢測(cè)室,此外還應(yīng)設(shè)置相對(duì)獨(dú)立的接待區(qū)和樣品采集區(qū),專門負(fù)責(zé)外來(lái)病例、樣品的登記、處理、保存、管理以及檢測(cè)報(bào)告的出具與保存等。同時(shí),實(shí)驗(yàn)室的建筑質(zhì)量要可靠,布局要合理,面積要合適,同時(shí)對(duì)溫度、濕度、除塵、通風(fēng)和污水處理等問(wèn)題均要在基礎(chǔ)建設(shè)時(shí)考慮在內(nèi)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)應(yīng)盡量獨(dú)立分區(qū),避免交叉污染,特別是分子生物學(xué)檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室,要嚴(yán)格進(jìn)行分區(qū),避免污染,保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。必要時(shí),也要設(shè)施一些公共實(shí)驗(yàn)室,如物品準(zhǔn)備室(放置制水機(jī)、高壓滅菌器、干烤箱等公用儀器設(shè)備)、藥品試劑室等。
2.2 實(shí)驗(yàn)室常用儀器設(shè)備
在配置儀器設(shè)備時(shí),應(yīng)根據(jù)實(shí)際工作需要,充分了解同類產(chǎn)品的性能和特點(diǎn)后選定。一方面要考慮其功能、配件等因素,充分發(fā)揮其功能和擴(kuò)展功能,另一方面,要考慮其使用價(jià)值及使用頻率,有目的的選擇,而不應(yīng)盲目求全。有些儀器自動(dòng)化程度高,操作方便,但價(jià)格昂貴,可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室工作量來(lái)確定。如果工作量不大,可適當(dāng)選擇自動(dòng)化程度稍低,但通過(guò)其他成本較低的方法來(lái)達(dá)到檢測(cè)目的的產(chǎn)品。有些大型儀器利用率很低,而在社會(huì)上可以有償使用的,則不提倡購(gòu)置,以免投入不必要的維護(hù)管理成本。
三、獸醫(yī)檢測(cè)診斷實(shí)驗(yàn)室工作人員的配置
根據(jù)獸醫(yī)臨床診斷的特點(diǎn)和需求,疫病診斷實(shí)驗(yàn)室的工作人員應(yīng)具有如下基本要求:具有扎實(shí)的專業(yè)知識(shí);具有良好的道德規(guī)范,能獨(dú)立完成診斷檢驗(yàn)的工作,對(duì)結(jié)果的判定不受外界因素的干擾影響;必須保持相對(duì)穩(wěn)定;具有高度的安全意識(shí);具有預(yù)防和處理感染事故的能力。
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